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课程名称 |
细胞生物学实验Cell Biology Experiment |
课程负责人 |
巴雪青 |
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开课学期 |
春季 |
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课程编号 |
LIF407 |
实验类型 |
验证性和综合性实验 |
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实验类别 |
专业基础 |
实验学分 |
2学分 |
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实验要求 |
必修 |
适应专业 |
生物科学 生物技术
环境科学 生态学 |
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实验学时 |
52 |
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制定时间 |
2006.12 |
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制 定 人 |
巴雪青 |
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审 定 人 |
朱筱娟 孙晖 |
一、实验教学目的
使学生通过细胞生物学实验课的学习， 更加感性地理解理论课上学到的基础知识，培养学生的动手能力和科学研究能力，使学生了解细胞生物学科研活动的实质和内涵。
学生通过该课程的学习，应能在教师的指导下独立完成所有实验项目。对每一个实验要做到：了解该领域研究现状，明白实验原理，掌握操作技术，得到合理的实验结果或结论，及时完成实验报告。修完本课后，学生应具有进行一般实验以及根据研究要求设计或改造某些实验的能力。
二、教学内容、要点和课时安排
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序号 |
实验项目 |
内容提要 |
学时 |
实验
类型 |
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1 |
细胞生物学常用特殊光学显微镜的了解和使用 |
了解几种细胞生物学常用光学显微镜的构造及其性能。
掌握几种细胞生物学常用光学显微镜的正确使用方法。
在倒置相差显微镜下，观察比较平场物镜与相差物镜下，培养细胞的视觉效果差异 |
4 |
基础 |
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2 |
常用电子显微镜的了解和使用 |
了解电子显微镜的主要结构、功能及基本工作原理。
了解电子显微镜的使用技术。 |
4 |
基础 |
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3 |
细胞膜渗透性的观察 |
了解细胞膜对不同物质通透性的差异
观察红细胞的溶血现象
建立等渗概念并理解溶血原理 |
4 |
综合 |
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4 |
细胞表面黏附分子的荧光标记及观察 |
学习膜蛋白的间接荧光免疫标记
学习荧光显微镜的使用 |
4 |
综合 |
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5 |
巨噬细胞吞噬活动的观察 |
通过小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活动观察加深理解细胞的吞噬作用；
掌握小鼠腹腔注射给药和颈椎脱臼处死方法。 |
5 |
综合 |
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6 |
动物细胞细胞骨架（微丝）的光学显微镜观察 |
了解细胞骨架的结构特征；
掌握去垢剂抽提制备细胞骨架的技术。 |
4 |
综合 |
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7 |
动物细胞细胞骨架（微丝）的荧光显微镜观察 |
学习贴壁细胞细胞骨架的荧光标记方法；
学习荧光显微镜的使用。 |
4 |
综合 |
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8 |
液泡系、线粒体的活体染色与观察 |
观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布；学习一些细胞器的超活染色技术。掌握细胞活体染色的相关技术。 |
5 |
基础 |
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9 |
PEG诱导的细胞融合 |
理解细胞融合的意义；
掌握聚乙二醇（PEG）为融合剂进行细胞融合的方法；计算融合效率 |
4 |
综合 |
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10 |
动物细胞的原代培养 |
了解原代细胞培养的基本方法及操作过程。学习细胞消化、细胞计数、营养液的配制及酸碱度的调节。初步掌握无菌操作方法，建立无菌操作观念。 |
5 |
综合 |
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11 |
磷酸钙沉淀法将DNA导入哺乳动物细胞 |
掌握磷酸钙沉淀法转染细胞的基本原理和技术要点；计算转染效率。 |
5 |
综合 |
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12 |
流式细胞仪的构造、工作原理及数据分析 |
了解流式细胞仪的构造、工作原理及数据分析；学习和了解利用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及抗原表达的实验方法。 |
4 |
基础型 |
三、使用说明
由教师讲授实验目的、意义、原理和方法。实验步骤可以多媒体课件形式演示给学生，课前的动物给药、模型制备可在实验老师的指导下与学生共同完成。实验具体操作由学生独立完成。同时，开放实验室，为学生提供自主实验的空间、时间及必要的仪器和药品。
四、考试方式
每次实验结束后，学生必须交实验报告，内容包括实验名称、目的意义、原理、步骤、结果、讨论等。实验报告应能体现出学生的学习态度及科学素质。
教师在教学过程中留心观察每一个学生的表现，掌握其学习态度、动手能力、创新思维及对结果的分析能力等。建议以百分制评定成绩，实验报告占80%，学习态度和动手能力评定占10%，科研素质评定占10%。
五、教材（讲义、指导书）
杨汉民.细胞生物学实验（第二版）.北京:高等教育出版社,1997.
参考书：
1. 章静波.细胞生物学实用方法与技术.北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,1995.
2. 朱立平,陈学清.免疫学常用实验方法.北京:人民军医出版社,2000.
3. 王金发,何炎明.细胞生物学实验教程.北京:科学出版社,2004.
4. 王书奎,周振英.实用流式细胞术彩色图谱.上海:第二军医大学出版社,2004.
2007/4/16
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